细胞培养间?细胞培养间设计

奔跑的细胞 280 0

【导读】细胞健康网整理“细胞培养间”的细胞科普,细胞存储、治疗找细胞健康网,细胞培养间设计的正文:

目录一览:

一个细胞培养实验室的平面布局,要怎么规划才合理?

细胞实验室一般可以分为6个区域:无菌操作区、孵育区、制备区、清洗区、消毒灭菌处理区、储藏区。

其中,无菌操作室是只限于细胞培养及其他无菌操作的区域,不能穿行或受其他干扰,划为三部分:

a) 更衣室——供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。

b) 缓冲间——位于更衣间与操作间之间,目的是为了保证操作间的无菌环境,同时可放置恒温培养箱碧渗及某些必需的小型仪器。

c) 无菌操作间——专用于无菌操作、细胞培养。

这方面设计经验比较丰富的渣喊,有上海的CEIDI西递,他们在江浙沪地区已经悔梁脊有了很多成功的案例。满意请给大大的赞

细胞培养间算得上是二级生物安全实验室吗

不算,细胞培养间多安全的。下面介绍一下生物安全实验室的分级:

BSL-1(P1实验室):代表病原体:麻疹病毒、腮腺炎病毒

简介:进行试验研究用的物质都是已知的所有特性都已清楚并且已证明不会导致疾病的多种微生物物质。研究通过日常的程序在公开的实验台面上进行。不需要有特殊需求的安全保护措施。操作人员只需经过基本的实验室实验程序培训并且通常由科研人员指导,在这样的环境下并不需要生物安全柜的存在。

BSL-2(P2实验室)代表病原体:流感病毒

简介:进行兄物试验研究用的物质是一些已知的中等程度危险性的并且与人类某些常见疾病相关的物质。操作者必须经过相关研究的操作培训并且由专业科研人员指导。对于易于污染的物质或者可能产生污染的情况进行预先的处理准备。一些可能涉及或者产生有害生物物质的操作过程都应该在生物安全柜内进行,在这些条件下最好使用二级的生物安全柜。

BSL-3(P3实验室)代表病原体:炭疽芽孢杆菌、鼠疫杆菌、结核分枝杆菌、狂犬病毒

简介:进行试验研究的物质一般都是本土或者外来的有通过呼吸传染的病原体,使人们致病或者有生命危险可能的物质。我们需要保护一切在周围环境中等操作者免于暴露于这些有潜在危险的物质中。通常使用二级或者三级的生物安全柜是必需的。

BSL-4(P4实验室)代表病原体:埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙病毒

简介:进行试验研究的物质是一些极高危险性并且可以致命的有毒物质,可以通过空气传播并且现今并没有粗念有效的疫苗或者治疗方法来处理。操作者必须经过熟练的关于进行这种极高危险性物质研究的培训,并且应该很熟悉一些相关操作,保护设施,实验室设计等等方面对于这些极高危险性物质的预防。同时也必须由在此研究领域非常有经验的科研人员进行指导,严禁独自在4级实验室工作。对于实验室的进出应当严格的进行控制,实验室一定要单独的建羡凳液造或者建造在一栋大楼中于其他任何地方都分离开的独立房间内,并且要求有详细的关于研究的操作手册进行参考。

细胞培养室可以使普通房间吗

不可以。隐橘细胞培养最好是在有消毒杀菌设备的实验室进行。

第一,无菌条件是细胞离体培养最基本的条件。普通房间就像你说的没有空气过滤、层流装念携磨置,容易污染标本,不能排除空气中的微生物的你的细胞培养皿有没污染。

第二,普通的房间不能满足细胞培养的外界条件(适宜的温度、空仔斗气、ph等)。

如何设计细胞培养实验室

来源喜格|细胞培育室简介:

细菌培养实验室是微生物实验室里面的配套实验卖兆亏室,细菌培养室用人工方法(使其在合适的温度,湿度,光照度,PH值,洁净度等环境下,使细菌生长繁殖,培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。广泛用于医药研究

二、细胞实验室根据功能分区

(1)划分为洁净区和非洁净区。

(2)洁净区包含:更衣区;缓冲区;细胞制备区;细胞培养区;配液区;微生物检测区。

(3)非洁净区包含:样本接收区;免疫检测区;细胞生物学检测区;理化检测区;物料存放区;清洗消毒区;气体储存区;信息中心区;细胞储存区;档案存放区。

三、细胞培养实验室工作内容

1.无菌操作

2.孵育

3.制备

4.清洗

5.消毒灭菌处理

6.储藏

四、细胞室设计基本设备

(1)显微镜:倒置显微镜——是组织中神细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。

(2)培养箱:体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,大多猜租数情况下,最适温度是37℃,温差变化一般不应超过±0.5℃,细胞在温度升高2℃时,持续数小时即不能耐受,40℃以上将很快死亡。因此需要有能控制温度的培养箱,如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO2培养箱。

(3)干燥箱:用于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,电热干燥箱升温较高,一般需达到160℃以上。通常使用鼓风式电热干燥箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风,应避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后,不能立即打开箱门以免骤冷而导致玻璃器皿损坏,应等候温度自然下降至100℃以下方可开门。

细胞培养间的通风系统是不是必须一直打开

细胞培养间的通风系统是必须一直打开。根据查询相关公开信息:细橘谈悔胞培养通风橱应始终侍团保持运转,长时间不使用时方可关闭,良好的个人卫生,操作细胞培养物前后应洗手,穿戴个人防圆正护设备。

细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项

一、细胞复苏

将冻消袭余存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。

加入10mlDMEM培养基清洗,弃上清液。加入10mlDMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。

二、细胞传代

细胞密度达到80%~90%时.去培养基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人细胞培养箱3min。加人1mlDMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。

加入10mlPBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。再加入10mlPBS(经高压灭菌,保存于40C),吹匀,吸取10微升进行计数,按照1×106/盘接种,在含5%CO2的细胞培养箱继续培养。

三、细胞冻存

细胞密度达到80%~90%时,去培养基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人细胞培养箱3min。加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。加入10mlPBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。

加入lml冻存液(90%血清,10%DMSO),放入冻存盒内(盒内有异丙醇,以保证温度降低的速度),立即放入一80℃冰箱内,过夜,第二天放入液氮中,可以保存至少两年,如不放人液氮,可以保存三个月。

冻存液的配制:70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。

注意事项

(1)进入细胞间开始细胞培养时,必须严格按照下列步骤操作:

①确定所有的细胞操作用的溶液和耗材都已经消毒并检测没有问题,不确定的溶液和耗材请勿使用,除非特殊情况,不要借用别人的溶液。

②确定衣服的袖口已经卷起或者白大褂的袖口已经扎紧。

③确定酒精灯内的酒精量,需要的话及时进行补充。

④确定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。为了方便单手开启瓶盖,实验开始前可以把所有禅枣瓶盖旋松。

⑤尽量不要直接倾倒溶液,除非瓶口没有被烧坏。如果倾倒失败,溶液粘在瓶口,请用喷过75%酒精的纸巾仔细清洁瓶口周围(不要接触到瓶口)后在火拿滚焰上简单烧灼。

⑥操作时如果不能肯定所用的耗材是洁净的,必须及时更换。

⑦实验完毕及时收拾,保持工作区域清洁整齐,最后用75%酒精清洁台面。

(2)细胞污染的预防

①实验用品防止污染。细胞培养所用试剂、耗材、器材的清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌要仔细,并在无菌实验检测阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁、消毒、灭菌。

②操作过程防止污染。

③穿着容易起静电或吸附灰尘的衣物必须更换为白大褂后才能进入细胞间。

④实验开始前需要确定戴的手套没有问题,只要接触过生物安全柜之外的物品,必须及时对手套进行消毒。

⑤进入细胞培养间后关好门,坐下来尽量少走动以免影响生物安全柜的风帘。工作开始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶盖。事先要严格检查所用的器材、溶液和细胞,不要把污染品或未经消毒的物品带入无菌室内,更不能随便使用,以免造成大规模污染。

⑥细胞操作时动作要轻,必须在火焰周围无菌区内打开瓶口,并将瓶口放在火焰周围简单转动烧灼,注意不要让火焰把塑料瓶口烧化。

⑦实验操作时生物安全柜的隔板要尽可能放低,尽量减少谈话,打喷嚏或咳嗽时绝对不能对着工作区,以免造成不必要的污染。

⑧瓶盖应当倒放在远离自己的地方,以避免瓶盖被误操作所污染。

⑨不要从敞开的容器口上方经过,以避免衣服上掉落不明物体对细胞的污染。

⑩实验操作时要注意及时更换巴斯德吸管、移液枪枪头和移液管,切勿一根管子做到底。一旦发现接触了非洁净或者无法确定洁净的物品必须直接丢弃。实验完毕应及时收拾,保持实验室清洁整齐,最后用75%酒精清洁台面。

(3)防止细胞交叉污染

①在进行多种细胞培养操作时,所用器具要严格区分,最好作上标记便于辨别。按顺序进行操作,一次只处理一种细胞,多种细胞多种操作一起进行时易发生t昆乱。

②在进行换液或传代操作时,粘有细胞的移液枪头和移液管不要触及试剂瓶瓶口,以免把细胞带到培养基中污染其他细胞。

③所有细胞一旦购置,或从别处引入,或自己建立,必须及时保种冻存,一旦发生污染可重新复苏细胞,继续培养。

扩展资料:

细胞培养(cellculture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。

不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。

细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用技术,通过细胞培养既可以获得大量细胞,又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。

参考资料:百度百科:细胞培养

【总结】关于“细胞培养间?细胞培养间设计”的解读完毕,干细胞治疗,免疫细胞存储找细胞健康网,细胞培养间设计更多细胞资讯看 https://yszxyy.com/

专注干细胞治疗、免疫细胞存储

长按复制微信号:13980848276 加好友

13980848276 点击电话咨询

美呗细胞

抱歉,评论功能暂时关闭!