细胞培养介绍?细胞培养

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举例说明细胞培养的目的与用途?

细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术.细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群.

1.药物研究与开发 (1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究,中药有效成分筛选与鉴定等.(2) 疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病扮衫孝毒疫苗,艾滋病疫苗等),肿瘤疫苗(多肽疫苗)等.(3) 基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞塌察生长因子研究与开发等.(4) 细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙,紫杉醇等生厅稿物活性成分研究与开发.(5) 单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体.2,生物制药 (1) 疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗,艾滋病疫苗等),肿瘤疫苗(多肽疫苗)等.(2) 基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素,粒细胞生长因子,胸腺肽等 (3) 诊断用和药用单克隆抗体生产 (4) 细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等

名词解释,细胞培养

细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在兆蚂无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其嫌含结构和功能的一种培养技芹猜笑术。

细胞培养的方法有哪些?求详解

细胞培养首先分为原代培养和传代培养侍简.

原代培养需要从组织中消化、分离、纯化出单细胞,然后继续进行传代、冻存;

传代培养首先:

细胞复苏:

1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-38度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.

2.在无菌台内将完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养瓶内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养,24h后换液;也可复苏当时离心(1000rpm 5min左右)后,完全培养基重悬培养,适时换液.

细胞传代:

1.贴壁细胞:

对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱.PBS清洗2-3次,去除血清和死细胞,50ml培养瓶加入消化液约0.6ml,按此比例进行消化,(根据配制强度经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱游尺落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后收集离心(1000rpm 5min左右),新鲜培养基重悬沉淀,加入完全培养基后继续培养或实验.

2.悬浮细胞:

一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度或需更换新培养基,可先离心(1000rpm,5min左右)后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养.

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细胞培养简介

目录 1 拼音 2 英文参考 3 概述 4 动物细胞培养 5 植物细胞培养 1 拼音

xì bāo péi yǎng

2 英文参考

cell culture

3 概述

细胞培养是广义的组织培养的一丛尘举种形式,将器官、组织用胰蛋白酶等处理分离出细胞,再移于玻璃容器中培养。

高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不适就要死亡。所以细胞培养技术(cell culture)就是选用最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的技术。

动物细胞的生存环境与植物细胞差别很大,因而二者的培养方法很不相同。

4 动物细胞培养

细胞培养方式大致可分为两种:一种是群体培养(mass culture),将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶兄穗中,让细胞贴壁生长,汇合(confluence)后形成均匀的单细胞层;另一种是克隆培养(clonal culture),将高度稀释的游离细胞悬液加入培养瓶中,各个细胞贴壁后,彼此距离较远,经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落,称为克隆(clone)。一个细胞克隆中的所有细胞均来源于同一个祖先细胞。此外,为了制取细胞产品而设计了转鼓培养法,使用大容量的圆培养瓶,在培养过程中不断地转动,使培养的细胞始终处渗碧于悬浮状态之中而不贴壁。

群体培养(左)和克隆培养(右)

实验室中常用的几种细胞系

 细胞系名称  细胞类型  来源  3T3  成纤维细胞  小鼠  HeLa  宫颈癌上皮细胞  人  BHK21  成纤维细胞  叙利亚仓鼠  PtKl  上皮细胞  袋鼠  L6  成肌细胞  大鼠  PCI2  嗜铬细胞  大鼠  SP2  浆细胞  小鼠  SP2/0  骨髓瘤浆细胞  小鼠  CHO  卵巢细胞  中国地鼠

 正常细胞培养的世代数有限,只有癌细胞和发生转化的细胞才能无限生长下去。所谓转化即是指正常细胞在某种因子的作用下发生突变而具有癌性的细胞。目前世界上许多实验室所广泛传用的HeLa细胞系就是1951年从一位名叫Henrietta Lacks的妇女身上取下的宫颈癌细胞培养而成。此细胞系一直延用至今。

1. 原代培养 (primary culture):从动物机体取出的进行培养的细胞群。原代培养的细胞生长比较缓慢,而且繁殖一定的代数后(一般10代以内)停止生长,需要从更换培养基。将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养(Passage)。

2. 细胞株(cell strain):从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群,能够繁殖50代左右,在培养过程中其特征始终保持。

3. 细胞系(cell line):从肿瘤组织培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞,在培养条件下可无限繁殖

4. 克隆(clone):亦称无性繁殖系或简称无性系。对细胞来说,克隆是指由同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。

5 植物细胞培养

植物细胞培养主要有如下几种技术:

1.组织培养:诱发产生愈伤组织,如果条件适宜,可培养出再生植株。用于研究植物的生长发育、分化和遗传变异;进行无性繁殖;制取代谢产物。

2.悬浮细胞培养:在愈伤组织培养技术基础上发展起来的一种培养技术。适合于进行产业化大规模细胞培养,制取植物代谢产物。

3.原生质体培养:脱壁后的植物细胞称为原生质体(protoplast),其特点是:①比较容易摄取外来的遗传物质,如DNA;②便于进行细胞融合,形成杂交细胞;③与完整细胞一样具有全能性,仍可产生细胞壁,经诱导分化成完整植株:

4.单倍体培养:通过花药或花粉培养可获得单倍体植株,经人为加倍后可得到完全纯合的个体。

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